斑馬魚(Zebrafish, Danio rerio) AB 或 TU 野生型品系均可。

1. 實(shí)驗動物

野生型斑馬魚 AB 品系。

2. 造模化合物及斑馬魚處理

采用高脂、高糖、高膽固醇三種飲食方案飼喂斑馬魚幼體。具體方案見圖1 （Ref.1）。主要步驟：取野生型斑馬魚幼體(5 dpf)，隨機(jī)分為4組：正常飲食(30 mg/d AP100)、高膽固醇(30 mg/d AP100 plus 4% (w/w) cholesterol)、高糖(30 mg/d AP100 plus 0.25%(w/v) fructose)、高脂(180 mg/d AP100)，按照各自飲食方案飼喂10天。飼喂終止后，空腹過夜，收集幼體進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗檢測。為了觀察膽固醇在體內(nèi)的分布，在4組食物中添加BODIPY 標(biāo)記的膽固醇(10μg/g cholesterylBODIPY 542/563-C11, Invitrogen)。

3. 模型分析指標(biāo)

（1） 癥狀觀察

觀察和拍照斑馬魚表型；測量斑馬魚幼體體長和稱重，統(tǒng)計學(xué)處理并比較 4組數(shù)據(jù)。

（2） 病理檢測

A. 對斑馬魚整體進(jìn)行油紅染色，檢測體內(nèi)脂質(zhì)蓄積水平和分布；熒光顯微鏡下觀察 BODIPY 標(biāo)記的膽固醇在體內(nèi)的分布和強(qiáng)度。B. 肝臟冰凍切片和油紅 O 染色；C. 肝臟石蠟切片和 H.E 染色。

（3） 病理診斷

采用肝臟組織切片和 HE 染色檢測，以脂質(zhì)/膽固醇在肝臟蓄積、或以大泡性為主的肝細(xì)胞脂肪變性為特征。